PLT VASP/P2Y12 流式檢測試劑盒

1 簡介：

血管擴張刺激磷蛋白（VASP）是一種重要的細胞內血小板蛋白，基礎狀態下處于非磷酸化狀態。其磷酸化，是受cAMP (環磷酸腺苷) 級聯調節。前列腺素E1(PGE1)會激活級聯反應，然而這種級聯調節通過P2Y12蛋白受體被ADP抑制。

在檢測時，VASP的磷酸化與P2Y12受體抑制效應密切相關，而VASP的非磷酸化狀態與P2Y12 受體激活相關。

噻氯匹定和氯吡格雷對血小板受體的抑制作用是不可逆的。這種效應通過PGE1的激活，同時ADP的加入，而使VASP保持磷酸化，而被證實。

本試劑盒利用雙色流式細胞測定術，通過VASP的磷酸化狀態的測定，從而檢測P2Y12受體活性。

2 方法：

先將全血單獨與PGE1孵育或與PGE1+ADP混合孵育。細胞滲透后，處于磷酸化狀態的VASP通過間接免疫熒光反應特異性的被單克隆抗體標記。使用雙色流式細胞分析測定單獨PGE1激活的和PGE1聯合ADP處理管的校準平均熒光強度（mean fluorescence intensities,MF1），經減去空白對照得到校正后的MFIc，即減去陰性對照之后的平均熒光強度。再計算血小板反應指數（Platelet reactivity index，PRI），即VASP磷酸化水平，評估標本中ADP抑制VASP磷酸化的程度。

3 試劑組成

注：提供Reagent 2a和Reagent 2b是過剩的。

4 需要自備的試劑

 1）旋渦混勻器

 2）計時器

 3）流式細胞儀

 4）移液器、槍頭

 5）上樣管