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Technical articles流式細胞儀實驗方法一、實驗準備1．標本制備：2．zui小化非特異性結合：二、凋亡1．凋亡的檢測方法：和其它2．PI染色法3．AnnexinV法4．TUNNEL法三、細胞因子1．激活的細胞因子2．CBA四、血小板1．活化2．活化檢測3．網織血小板五、紅細胞1．網織紅細胞2．PNH3．胎兒紅細胞六、腫瘤學1．DNA細胞周期2．蛋白3．多藥耐藥4．微小殘留白血病*部分標本處理一、流式細胞術常規檢測時的樣品制備（一）直接免疫熒光標記法取一定量細胞（約1X106細胞／ml），在每一管中...
流式細胞儀標本的制備流式細胞儀（FCM）是八十年代集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀器，已廣泛應用于免疫學、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方面的研究和臨床常規工作。其中檢測人白細胞表面標志可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷，對淋巴細胞群和亞群進行分類，還能分離純化某一群或亞群細胞。活細胞免疫熒光技術是用于FCM檢測的標本準備，染色后也能在熒光顯微鏡下進行觀察，在某些實驗條件下，活細胞免疫熒光染色后的特異性和敏感性要優于滴片固定的常規間接免...
ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來，發展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。（一）原理ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除...
臨床檢驗常見的標本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些標本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。一、血液標本有些生理因素，如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化，有些甚至還有晝夜變化。因此血液標本的采集應盡量避免生理因素干擾，以條件一致為宜，如無法避免，應在標本上注明該因素。1．外周血一般選取左手無名指內側采血，該部位應無凍瘡，炎癥，水腫，破損。如該部位不符合要求，以其他手指部位代替。對燒傷...
WesternBlot工作原理蛋白質的電泳分離是重要的生物化學分離純化技術之一,電泳是指帶電粒子在電場作用下,向著與其電荷相反的電極移動的現象.根據所采用的支持物不同,有瓊脂糖凝膠電泳,淀粉凝膠電泳,聚丙烯酰胺凝膠電泳等.其中,聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）由于無電滲作用,樣品用量少（1-100μg）,分辨率高,可檢出10-9-10-12mol的樣品,凝膠機械強度大,重復性好以及可以通過調節單體濃度或單體與交聯劑的比例而得到孔徑不同的凝膠等優點而受到廣泛的應用.SDS-PAG...
熒光探針Fluo-3/AM和FuraRed測量單細胞中比率鈣中國醫學物理學雜志1999年第3期第16卷實驗研究作者：馬曉冬朱曉亮趙清張瑾張颯雷國華黃行許鮑永耀單位：馬曉冬趙清張瑾張颯雷國華黃行許鮑永耀（*軍醫大學中心實驗室）；朱曉亮（南方醫院皮膚科,廣東廣州510515）關鍵詞：激光掃描共聚焦顯微鏡；Fluo-3/AM；FuraRed；比率鈣...摘要：應用ACAS570激光掃描共聚焦顯微鏡（laserscanningconfocalmicroscope，LSCM簡稱共焦顯微...
激光掃描共焦顯微鏡（LSCM）是八十年代問世的一種新型分析儀器，由于其高分辨率，高靈敏度，高放大率等特點，在細胞水平上能作多種功能測量和分析，成為分析細胞學的重要研究工具，激光掃描共焦顯微鏡是在顯微鏡基礎上配置激光光源，掃描裝置，共軛聚焦裝置和檢測系統而形成的新型顯微鏡。它對活細胞分層掃描后得到光學切片，可進行細胞三維重建。測量分析細胞形態學參數和熒光強度。利用熒光探針標記LSCM可以對細胞內微細結構和離子的動態變化進行定性、定量、定時和定位分析。LSCM可以進行顯微手術，細...
流式細胞儀測定血小板胞漿游離鈣濃度莊明明，溫奕欣，劉少列，洪曉鵬西安交通大學學報2005年10月第26卷第5期摘要：目的建立流式細胞儀測定血小板胞漿游離鈣離子濃度\[Ca2+\]i的方法。方法用Fluo3AM作為鈣指示劑，在有或無細胞外鈣\[Ca2+\]o存在的條件下，測定靜息和凝血酶激活狀態下人血小板胞漿游離鈣離子濃度\[Ca2+\]i的變化。結果Fluo3AM標記的血小板的平均熒光強度明顯增加。凝血酶使負載Fluo3AM標記的血小板胞漿\[Ca2+\]i明顯增加，且...
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