技術文章
Technical articles1、載玻片的處理：抗原修復過程中，由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響，極易造成脫片。為保證試驗的正常進行，可選用我公司提供的ZLI-9001APES、ZLI-9003HistogripTM或ZLI-9005Poly-L-Lysine等幾種試劑，對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下：1.1APES：現用現配。將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的APES中，停留20~30秒鐘，取出稍停片刻，再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結合的APES，置通風櫥中晾干即可。用此載玻片撈片時...
１原理用一種能破壞血液中的紅細胞，但能保護血小板形態完整的稀釋液稀釋血液，滴入血細胞計數池，在高倍鏡下直接計數血小板數。２器材和試劑器材同白細胞計數法。稀釋液用許汝和氏尿素稀釋液。許汝和氏尿素稀釋液配制法：尿素１０ｇ，福爾馬林０．１ｍｌ，枸櫞酸鈉０．５ｇ，加水至１００ｍｌ，溶解后過慮，在冰箱內保存。３操作步驟ａ．用２ｍｌ吸管準確吸取血小板稀釋液０．３８ｍｌ置小試管中。ｂ．從耳垂采血，用０．０２ｍｌ吸管準確吸取*滴血，吹入稀釋液中，并吹吸兩次洗凈吸管壁內的血。ｃ．充分振搖，滴入...
１原理用稀乙酸將血液稀釋２０倍，使紅細胞全部溶解，滴入白細胞計數池中，在顯微鏡下計數，求得每立方毫米血液中的白細胞數。２器材和試劑２．１器材生物顯微鏡、Ｎｅｕｂａｕｅｒ氏血細胞計數池、０．０２ｍｌ吸管、小試管、刺血針、２ｍｌ吸管。２．２試劑白細胞稀釋液：采用３％乙酸溶液。３稀釋液的配制采用３％乙酸溶液。即取冰乙酸３ｍｌ，加蒸餾水至１００ｍｌ混合。亦可于上述稀釋液中加美藍或龍膽紫液１～２滴，便于觀察。稀釋液應經常過濾，以除去塵埃、異物或微生物的影響。４方法４．１取血于小試管中加...
ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用，但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給同行帶來一些啟發，提高試驗質量。操作步驟可能原因解決辦法選擇試劑選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣1.血清或血漿標本分離不好即進行加樣；2.手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長（特別是...
材料與試劑1．抗凝劑（1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其鈉鹽或鉀鹽，它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶，進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白，從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1000U/ml，市售肝素多為100U~126U／mg。（2）乙二胺四乙酸（EDTA）：是一種螯合劑。用生理鹽水配制成4％的溶液備用。（3）阿氏液（Alsever液），配方如下：枸櫞酸鈉（Na3C6H5O7·5H2O）0.80g枸櫞酸0.0325g葡萄糖2.05g氯化鈉0.42gH2O加至100.00ml...
在體外進行細胞免疫檢測時，首先必須進行淋巴細胞的分離。分離淋巴細胞的方法很多，但不管采用哪種方法，均要求分離的淋巴細胞純度高、產量多，而且不喪失活性，同時也要求分離技術簡單、操作方便。外周血液中紅細胞和白細胞的比例在幾百甚至上千比一，兩類細胞的大小和密度不同，其沉降速度也就不同。紅細胞的自然沉降率較快，加入高分子量的聚合物，如明膠、右旋糖酐等還可以加速其凝聚。利用自然沉降法、密度梯度離心法或二者結合，可以將淋巴細胞從血液中分離出來。這種分離出的淋巴細胞一般包括單核細胞。除去單...
一、原理ELI-SPOT，即斑點ELISA，是利用酶標板作反應容器進行的酶聯免疫反應。其基本原理與ELISA相同。首先用捕獲抗體包被反應板，封閉后，依次加入待檢標本、生物素化檢測抗體、鏈霉菌抗生物素蛋白-堿性磷酸酶及底物，陽性結果出現斑點顯色，利用倒置顯微鏡進行斑點計數。其優勢在于可在與體內（活體條件）極接近的條件下，在體外對細胞分泌成分（如細胞因子、Fas等）進行追蹤研究。幾點說明：l反應板：ELI-SPOT所用的反應板可以是PVDF膜包被好的，也可以是普通酶標板。如用普通...
細胞內鈣離子PH值和其它離子的動態分析通過Indo-1、Fluo-2、Fluo-3、Calciumgreen、SNARF等多種熒光探針，可對細胞內鈣離子、鈉離子及PH值等作熒光標記并對它們進行比率值和濃度梯度變化測定。由于細胞內鈣離子為傳遞信息的第二信使，對細胞生長分化起著重要作用，通過單標記或雙標記對細胞內鈣離子和其它離子的熒光強度和分布測定，測定樣品達到毫秒級的快速變化。借助光學切片功能可以測量樣品深層的熒光分布以及細胞光學切片的生物化學特性的變化。通過不同時間段的檢測可...
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